一、結(jié)構(gòu) 1、柱管
超高壓色譜柱的柱管通常由高強(qiáng)度材料制成，這種材料的選擇是為了能夠承受遠(yuǎn)高于傳統(tǒng)色譜柱的高操作壓力。柱管的內(nèi)徑相對(duì)較小，較小的內(nèi)徑有助于增加柱壓，在超高壓環(huán)境下實(shí)現(xiàn)快速分離。 較長的柱長可以提供更好的分離效果，但會(huì)增加分析時(shí)間。
2、填料
使用的填料顆粒非常小，甚至更小。常見的填料有硅膠及其化學(xué)改性材料。這些小顆粒能夠增加柱子的比表面積，提供更多的交互位點(diǎn)。
填料的表面性質(zhì)多樣，有鍵合非極性基團(tuán)、極性基團(tuán)等不同類型的填料，以適應(yīng)不同的分析需求。
3、篩板與端蓋
篩板位于柱兩端，是微孔濾網(wǎng)結(jié)構(gòu)。它的作用是阻止填料顆粒隨流動(dòng)相流出，同時(shí)允許流動(dòng)相和樣品順利通過。
端蓋用于密封柱管兩端，防止污染物進(jìn)入和流動(dòng)相蒸發(fā)。端蓋與柱管之間通過螺帽連接，螺帽還能起到保持柱內(nèi)壓力的作用。
二、工作原理
超高壓色譜柱基于樣品中的組分在流動(dòng)相和固定相之間的分配系數(shù)不同而進(jìn)行分離。當(dāng)流動(dòng)相攜帶樣品進(jìn)入色譜柱后，由于柱內(nèi)的固定相具有特殊的表面性質(zhì)，樣品中的不同組分與固定相之間會(huì)發(fā)生相互作用。
在超高壓環(huán)境下，由于填充了小顆粒填料并且柱體能承受高壓，流動(dòng)相可以高速通過色譜柱。在反相色譜柱中，流動(dòng)相極性大于固定相極性，極性較弱的組分在流動(dòng)相中的溶解度相對(duì)較大，分配系數(shù)較大，會(huì)更快地隨流動(dòng)相流出柱子；而極性較強(qiáng)的組分與固定相的相互作用較強(qiáng)，分配系數(shù)較小，在柱內(nèi)的保留時(shí)間更長。
柱內(nèi)的壓力促使流動(dòng)相快速流動(dòng)，從而縮短了分離時(shí)間，并且小顆粒填料增加了柱子的表面積，使得樣品組分與固定相有更多的接觸機(jī)會(huì)，一方面加快了分離速度，另一方面也有助于提高分離的分辨率。同時(shí)，在離子交換色譜柱或手性分離色譜柱等特殊類型的超高壓色譜柱中，組分的離子性質(zhì)或手性特征等也會(huì)影響它們與固定相的相互作用，從而實(shí)現(xiàn)特定類型的分離。
