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色譜柱壽命短?這有辦法“柱”你益壽延年!

更新時(shí)間:2019-07-11 點(diǎn)擊次數(shù):2329

 

您在日常的實(shí)驗(yàn)過程中用的色譜柱有沒有壽命過短的問題?不但實(shí)驗(yàn)成本攀升,實(shí)驗(yàn)效果都沒法保證。我們今天就邀請(qǐng)?jiān)滦窨萍嫉墓こ處焷頌槟獯鹩嘘P(guān)色譜柱使用壽命的相關(guān)問題,助您的柱子“益壽延年”!

 

為什么檢測(cè)該項(xiàng)目使用不同品牌的色譜柱,壽命均在100針左右?

1)有可能的原因是樣品組分吸附在色譜柱的前段??赡苁怯捎跇悠吩诹鲃?dòng)相中的溶解度低而沉淀出來的,也有可能是強(qiáng)吸附,或是樣品本身與填料表面發(fā)生微弱的不可預(yù)知的化學(xué)反應(yīng)。樣品溶液本身的pH值在色譜柱的耐受臨界值附近,而且進(jìn)樣體積較大(內(nèi)徑4.6mm,上樣體積在50ul以上)對(duì)柱頭端的填料影響比較大,通常這樣的情況伴隨柱壓升高。

 

解決方法:選擇合適的樣品前處理技術(shù),去除掉強(qiáng)保留物質(zhì)。使用保護(hù)柱,盡量選擇與分析柱同種填料,同種鍵合方法的保護(hù)柱。如果使用不同品牌的填料、裝填工藝的保護(hù)柱,在分離能力和保護(hù)分析柱方面可能得不到好的效果。也不要使用更大粒徑的保護(hù)柱,更大粒徑或者裝填較差的保護(hù)柱會(huì)因?yàn)樗姆逭箤捵饔枚鴮?dǎo)致分離能力下降。

 

2)鍵合相脫落變性。色譜條件多方作用導(dǎo)致壽命短,這是目前的色譜技術(shù)不能解決的,一般情況下小基團(tuán)鍵合相更容易被水解而脫落。流動(dòng)相中鹽濃度越高,越容易引起水解。這種情況下,就只能重新開發(fā)色譜條件。

 

為什么該品牌的色譜柱一直很好,就這一支壽命異常短?

確定一下使用頻率、沖洗頻率、流動(dòng)相的更換頻率、流動(dòng)相的試劑品牌、純度等是否和之前一樣,如果有更換,那壽命有差異是正?,F(xiàn)象。如果都與之前相當(dāng),那需要檢查這支色譜柱是否受過劇烈震蕩,比如:不小心摔過,或者運(yùn)輸過程中受過劇烈震蕩,建議與廠家的技術(shù)人員溝通。

 

為什么使用該品牌的支色譜柱用于方法建立時(shí)壽命長(zhǎng),方法建立后,開始進(jìn)行方法驗(yàn)證時(shí),卻覺得壽命短?

這種情況的發(fā)生,很大的原因是,前期建立方法時(shí),并不是連續(xù)做項(xiàng)目,而是不停地更換流動(dòng)相。這就意味著色譜柱的沖洗頻率比較高,而更換的流動(dòng)相的清潔度也是比較好的。建立方法的時(shí)候很難連續(xù)進(jìn)樣多次,有時(shí)候甚至一周才做一次項(xiàng)目,這樣就會(huì)產(chǎn)生支柱子使用時(shí)間更久的錯(cuò)覺。而方法建立后,做方法驗(yàn)證,流動(dòng)相固定下來,就會(huì)一次性配置較大體積的流動(dòng)相,這樣流動(dòng)相較易變質(zhì),有時(shí)肉眼不能直接分辨。而且會(huì)連續(xù)多次過夜進(jìn)樣,這樣對(duì)色譜柱的沖洗也不是很及時(shí)。這些都是可能導(dǎo)致色譜柱壽命變短的因素。

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